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β-受體激動(dòng)劑（β－agonists）是一類人工合成藥物，主要用于防治人、獸支氣管哮喘和支氣管痙攣。β-受體激動(dòng)劑在體育比賽中可用于增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)員、動(dòng)物(如馬)肌肉，提高運(yùn)動(dòng)成績(jī)，奧委會(huì)將β-受體激動(dòng)劑列為禁用藥物。β-受體激動(dòng)劑根據(jù)苯環(huán)取代基結(jié)構(gòu)分為苯胺型（如：克倫特羅，俗稱：瘦肉精）、苯酚型（沙丁胺醇）、間苯二酚型（如：特布他林）。

80年代，國(guó)內(nèi)外研究表明，在飼料中添加β-受體激動(dòng)劑具有營(yíng)養(yǎng)再分配作用，可以明顯提高瘦肉率。1992年，西班牙發(fā)生物多人食用含β-受體激動(dòng)劑的畜產(chǎn)品中毒事件；1997年，香港發(fā)生進(jìn)食大陸供港豬的內(nèi)臟引起人中毒等事件。隨著中國(guó)加入WTO后，國(guó)外對(duì)于中國(guó)出口的食品提出更高的要求，我國(guó)因獸藥殘留問題出口歐盟肉制品也屢次受阻；普通大眾也需要無公害食品。因此，對(duì)β－受體激動(dòng)劑的分析研究不僅在臨床藥物代謝動(dòng)力學(xué)上、體育運(yùn)動(dòng)中，而且在食品安全方面都有重要意義。目前，我國(guó)對(duì)β-受體激動(dòng)劑的檢測(cè)方法主要有GB/T 22286-2008 動(dòng)物源性食品中多種β-受體激動(dòng)劑殘留量的測(cè)定 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法及GB/T 21313-2007 動(dòng)物源性食品中β-受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè)方法 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法等。

本方法建立了β-受體激動(dòng)劑藥物藥物在豬肝、豬肉、牛奶和雞蛋等動(dòng)物源性食品中的LC/MS/MS檢測(cè)方法，其基本原理為：組織樣品中的β-受體激動(dòng)劑殘留藥物經(jīng)酶解，用高氯酸調(diào)節(jié)pH值后，在酸性條件下沉淀蛋白，上清液用Retain-CX固相萃取柱凈化，Hypersil Gold HPLC色譜柱分離，液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜（LC/MS/MS）法檢測(cè)。方法靈敏度、提取回收率、重現(xiàn)性等均滿足國(guó)內(nèi)外監(jiān)控和檢測(cè)要求。

樣品前處理

酶解

動(dòng)物源性樣品2g（到0.01g）于50mL 離心管中，加入0.2mol/L 乙酸胺溶液（pH5.2）10mL 然后加入β- 鹽酸葡萄糖醛苷酶/ 芳基硫酸酯酶40μL，渦旋混勻3min，于37℃下水浴避光振蕩16h。

提取

樣品酶解后放置至室溫，渦旋混勻3min，高速離心10min，取出上清液，加入1mol/L 高氯酸溶液1mL，渦旋，混勻，高速離心10min 后，轉(zhuǎn)移上清液至另一50mL離心管內(nèi)。

SPE操作步驟

200mg 3mL HyperSep Retain-CX 固相萃取柱

(貨號(hào)：60107-304)

活化

3mL 甲醇，3mL 水，3mL 0.5mol/L 高氯酸

上樣

將上清液上樣至小柱中（1d/s）

清洗

3mL 水，3mL 甲醇，柱子抽干

洗脫

3mL 5% 氨水甲醇溶液

儀器條件

色譜條件

色譜柱：Hypersil Gold，5μm，2.1×150mm（貨號(hào)：25005-152130）

流動(dòng)相A: 水（5mM 乙酸銨） B: 甲醇

梯度洗脫程序

進(jìn)樣量：10μL

流速：250μL/min

質(zhì)譜條件

電噴霧電離源（ESI），正離子模式

選擇反應(yīng)監(jiān)控（SRM）掃描模式

噴霧電壓：4500V

離子傳輸管溫度：350℃

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

回收率：75-120%

定量限（LOQ）：本方法沙丁胺醇、非諾特羅、氯丙那林、萊克多巴胺、克侖特羅、妥布特羅、噴布特羅和心得安在豬肝、豬肉、牛奶和雞蛋等動(dòng)物源性食品組織中的定量限均可達(dá)0.1μg/kg，西馬特羅、特布他林為0.5 μg/kg。

結(jié)論

本方法建立了β-受體激動(dòng)劑藥物藥物在豬肝、豬肉、牛奶和雞蛋等動(dòng)物源性食品中的LC/MS/MS檢測(cè)方法，其基本原理為：組織樣品中的β-受體激動(dòng)劑殘留藥物經(jīng)酶解，用高氯調(diào)節(jié)pH值后，在酸性條件下沉淀蛋白，上清液再用Retain-CX固相萃取柱凈化，Hypersil Gold HPLC色譜柱分離，液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜（LC/MS/MS）法檢測(cè)。提取回收率均可達(dá)75-120%，滿足國(guó)內(nèi)外的低檢出限要求，并且定量定性準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好。